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      elisa試劑盒的詳細操作過程和注意事項【犬elisa試劑盒】

      發布時間:2021/6/10 8:52:08      閱讀次數:1228

       樣本處理及要求

      1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20

      分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融.

      2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000

      ×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融.

      3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞

      會影響測量結果),稱重后將組織剪碎.將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量

      體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記

      錄.推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨.為了進一步裂

      解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融.后將勻漿液于5000×g離心5~10

      分鐘,取上清檢測.

      4. 細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置

      于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融.訂購聯系當地經銷商 技術:經銷商轉廠家

      注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測.

      需要而未提供的試劑和器材

      1. 酶標儀(450nm)

      2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL 2-20uL 20-200uL 200-1000uL

      3. 37℃恒溫箱

      4. 蒸餾水或去離子水

      試劑盒組成

      名稱 96 孔配置 48 孔配置 備注

      微孔酶標板 12 孔×8 條 12 孔×4 條 無

      標準品 0.3mL*6 管 0.3mL*6 管 無

      樣本稀釋液 6mL 3mL 無

      檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無

      20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書進行稀釋

      底物 A 6mL 3mL 無

      底物 B 6mL 3mL 無

      終止液 6mL 3mL 無

      封板膜 2 張 2 張 無

      說明書 1 份 1 份 無

      自封袋 1 個 1 個 無

      備注:

      1. 標準品濃度依次為:48 24 12 6 3 1.5 nmol/L

      2. 經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中

      直接取50μL樣本上樣即可.當有部分樣本值超過大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本

      進行適當稀釋后再進行實驗.

      注意事項

      1. 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果.所有試劑都必須在使用前達到室

      溫 20-25℃.使用后立即冷藏保存試劑.

      2. 洗板不正確可以導致不準確的結果.在加入底物前確保盡量吸干孔內液體.溫育過程中

      不要讓微孔干燥掉.

      3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響 OD 值.

      4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用.

      5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果.

      6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射.訂購聯系當地經銷商 技術:經銷商轉廠家

      7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上.

      8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體.任何漂白成分都會破壞

      試劑盒中反應試劑的生物活性.

      9. 不能使用過期產品.

      10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置.

      試劑準備

      試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用.

      20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水.

      操作步驟

      1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃.

      2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;

      3. 樣本孔中加入待測樣本 50μL;空白孔不加.

      4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體

      100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱

      泉州市睿信生物科技有限公司會定期發布新品推薦和產品規格參數.公司主要經營:elisa試劑盒 大鼠/小鼠/牛/羊/犬elisa試劑盒 人elisa試劑盒 胰島素/白介素/白細胞介素elisa試劑盒等產品.歡迎來電咨詢產品,新聞轉自網絡,如果有內容侵權請聯系本公司,會及時做出刪除處理,謝謝!

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